琼脂糖凝胶

概括：这道题是虞腹沿同学的课后练习题，主要是关于琼脂糖凝胶，指导老师为幸老师。琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。

题目：琼脂糖凝胶

解：

琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分离范围参数：

凝胶浓度（%） 线性DNA长度（bp）

0.5 1000～30000

0.7 800～12000

1.0 500～10000

1.2 400～7000

1.5 200～3000

2.0 50～2000

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举一反三

例1： 在做琼脂糖凝胶电泳时,如果胶的浓度不合适,会发生什么情况

思路提示：

一般要根据要电泳分离的核酸的分子量大小：分子量大的核酸电泳时使用浓度较小的凝胶,分子量小的核酸电泳时使用浓度较大的凝胶.核酸在浓度越大的凝胶中电泳速度越小.如果胶浓度偏高,可能跑不动,如果胶浓度偏低,可能跑得太快,分不开.

可以查到核酸分子大小与琼脂糖浓度范围的对应关系.

例2： 如何做好琼脂糖凝胶电泳,和琼脂糖凝胶电泳的作用[物理练习题]

思路提示：

注意煮胶完全,不然有小颗粒会影响跑胶结果.还有点样时别锉到胶.琼脂糖凝胶电泳就是根据DNA分子的分子大小将DNA分开.当然,跑胶也与DNA所带电荷多少有关,但相比于分子大小的影响就忽略不计了.

例3： 琼脂糖凝胶电泳时,琼脂糖的浓度为2%,胶不凝是怎么回事啊?还要继续增大琼脂糖的浓度吗?我见书上说2%的浓度做出来的胶很好很合适的了,可我按这个浓度做的胶却不能拿,一动就烂.

思路提示：

你确定你配制的胶是2%的吗?正确的配制方法是：小胶板的话,称0.26g的琼脂糖,取13mL的TBE缓冲液,熔胶,待稍冷却,加1uL左右的goldview,倒板,20min以后拔梳子.我们用的0.8%的都凝得很好,2%不可能不凝,你再看看你的胶配的方法对不对,看看是不是用的琼脂糖,如果都对,那就是琼脂糖不能用了.给点分吧.

例4： 电泳制胶的琼脂糖含量为1%至2%的根据是什么?[化学练习题]

思路提示：

电泳样品片断的大小,片断大,含量小

因为,你的样品要通过凝胶孔隙,才能跑胶

例5： 琼脂糖凝胶电泳请问电泳缓冲液为什么要没过凝胶面约1mm?另外,可以先加样再让电泳缓冲液没过胶面吗?

思路提示：

其实就是必须让缓冲液没过胶而已

可能是为了凝胶的截面上的电场比较均匀把

先加样不太好,加缓冲液的时候,缓冲液进入加样孔,容易把点好的样品给冲出来

相关思考练习题：

题1：琼脂糖电泳有何优缺点？

点拨：琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。 琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段，其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低，但它制备容易，...

题2：在琼脂糖凝胶电泳过程中,如何选择琼脂糖浓度？

点拨：琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分离范围参数： 凝胶浓度（%） 线性DNA长度（bp） 0.5 1000～30000 0.7 800～12000 1.0 500～10000 1.2 400～7000 1.5 200～3000 2.0 50～2000 乐研生物，为您解答，希望能帮到你，望采纳！

题3：如何制备核酸琼脂糖凝胶，操作中应注意什么

点拨：琼脂糖凝胶电泳是常用的分离和检测方法，琼脂是最常用的载体支持物，核酸分子具有电荷效应和分子筛效应，利用此特性可达到分离检测的目的。 一、琼脂糖凝胶的特点 天然琼脂(agar)是一种多聚糖，主要由琼脂糖(agarose，约占80%)及琼脂胶(agaropec...

题4：琼脂糖凝胶电泳的原理什么

点拨：琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。 琼脂糖凝胶具有网络结构，物质分子通过时会受到阻力，大分子物质在涌动时受到的阻力大，因此在凝胶电泳中，...

题5：关于琼脂糖凝胶电泳图片分析

点拨：条带分开的程度看你实验的需求。如果你的Marker相邻两个条带相差100bp，而你的样本阳性结果和多带一个内含子的假阳性结果只差50bp（比方说你在做反转录PCR实验)那你当然需要分清楚一些。否则的话只要看得清楚你的样本条带是位于那两个Marker条带...